檸檬酸(CA)含量測定樣本的前處理:
組織、細(xì)菌或細(xì)胞中胞漿蛋白與線粒體蛋白的分離:
①稱取約0.1g組織或收集500萬細(xì)菌或細(xì)胞,加入1mL試劑一和10uL?試劑三,用冰浴勻漿 器或研缽勻漿。
②將勻漿600g,4℃離心5min。
③棄沉淀,將上清液移至另一離心管中,11000g,4℃離心10min。
④上清液即胞漿提取物,可用于測定從線粒體泄漏的α-KGDH(此步可選做)。
⑤在步驟④的沉淀中加入200uL試劑二和2uL?試劑三,超聲波破碎(冰浴,功率20%或200W, 超聲3秒,間隔10秒,重復(fù)30次),用于線粒體α-KGDH活性測定。
測定原理:α-KGDH催化α-酮戊二酸、NAD+?和輔酶A生成琥珀酰輔酶A、二氧化碳和?NADH,NADH在340?nm有特征吸收峰,以NADH的生成速率表示α-KGDH活性。自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器:紫外分光光度計、水浴鍋、臺式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水。
雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶DYRK2抗體
鋅指結(jié)構(gòu)蛋白酶20抗體
C型凝集素受體CLEC13A抗體
雙甲基精氨酸水解酶2抗體
D酪氨酸激酶衰減蛋白1抗體
雙特異性酪氨酸磷酸化調(diào)節(jié)激酶3抗體
肌營養(yǎng)蛋白α抗體
多巴胺β羥化酶抗體
抑癌基因抗體
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶1抗體
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3α抗體
DNA甲基轉(zhuǎn)移酶-3β抗體
死亡受體3抗體
死亡受體4抗體
精神分裂癥易感基因抗體
蓬亂蛋白1抗體
異常凝血酶原/脫-γ-羧基凝血酶原抗體
結(jié)蛋白抗體
DISC1 C端抗體
DISC1 N端抗體
多能發(fā)育相關(guān)基因2抗體
結(jié)腸直腸癌缺失基因抗體
多巴胺脫羧酶抗體
防御素β1/Defensin β1抗體
DLX4抗體
DTX1抗體
絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1抗體