PCR反應(yīng)體系被污染會(huì)導(dǎo)致PCR結(jié)果出現(xiàn)假陽性,需要設(shè)置陰性對(duì)照來排除。將使用的移液器槍頭浸泡在2× Blood Master Mix中,添加引物,ddH2O進(jìn)行PCR擴(kuò)增;另取ddH2O作為模板,用目的基因引物進(jìn)行PCR擴(kuò)增,以排除PCR體系是否被污染和實(shí)驗(yàn)是否有其他污染源。
腺伴隨病毒PCR試劑盒注意事項(xiàng):
1. 盡量使用新鮮抗凝血。若凍存血,應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2. 解凍后2× Blood Master Mix可能出現(xiàn)渾濁,冰上放置1-2 min,待溶液澄清后,上下顛倒混勻,不影響試劑性能。
3. 電泳檢測時(shí),切勿使用含有 SDS 的Loading Buffer,否則在電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶,影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。
4. 建議擴(kuò)增片段長度1 kb以內(nèi),以便擴(kuò)增效率jia。
5. 為了您的安全和健康,請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并戴一次性手套操作。