1、ELISA試劑盒進口大鼠基因工程試劑對免疫測定技術(shù)發(fā)展的影響
免疫測定技術(shù)的基礎(chǔ)在于抗原抗體之間的特異結(jié)合反應,所以任何的診斷試劑離不開的原料,如抗原抗體,酶等。以前用于免疫測定的抗原通常為各種純化抗原,而抗體則為純化抗原免疫動物后獲得的多克隆抗體和使用雜交瘤技術(shù)得到的單克隆抗體,ELISA試劑盒進口大鼠而抗原或抗體的標記物如酶標結(jié)合物則通過各種化學合成方法制備。近年來,隨著分子生物學的發(fā)展,使用基因工程方法制備各種特殊的抗原或抗體及其酶結(jié)合物等免疫測定試劑幾成為現(xiàn)實的新一代試劑,各種新型使用的測定方法也不斷出現(xiàn)。
HBsAg試劑特點(檢測模式:臨床抗體夾心法):
包被抗體為山羊多抗,多抗具有高親和性和對抗原各種表位的反應性。
酶表抗體為與HBsAg有不同結(jié)合位點的鼠復合單位。
可測得HBsAg變異樣品。
提高檢測的特異性(99.98%)
提高檢測的靈敏度,應用Parl Ehrich 學說(PEI)HBsAg標準品,對ad標準品的靈敏度為0.05ng/ml對ay標準品靈敏度為0.025ng/ml
2、基因工程
較早用于免疫測定的基因工程抗原是HBcAg和HBsAg,這兩種基因工程抗原的出現(xiàn),較好地解決了抗HBc和HBe的測定問題。因為要從病毒本身去大量獲取這兩種純抗原較為困難,并且這一點對于難培養(yǎng)的病原微生物來說,如HIV、HCV和梅毒螺旋體等都有些共性。
2.1 HCV-ELISA試劑盒進口大鼠
HCV目前尚不能體外培養(yǎng),只能用基因工程或化學合成方法獲取HCV結(jié)構(gòu)和非結(jié)構(gòu)區(qū)的各種抗原片斷,已知HCV基因組有7個功能區(qū)組成:核心、E1、E2/NS1 NS2 NS3 NS4 NS5(有分為NS和NS5b)區(qū),合成抗原的優(yōu)點是易于純化,特異性好,抗原抗體反應強。
2.1.1 *代抗HCV-ELISA試劑盒進口大鼠
-由美國ortho公司克隆C1003抗原幾個片斷與人超氧化物歧化酶(SOD)結(jié)合。用酵母從病毒基因組非結(jié)合區(qū)得到表達,表達為融合蛋白,亦作為包被固相載體。
-抗原組合:NS4 區(qū)二個基因片斷為NS 5-1-1和C1003
-特性:IgG抗C100在發(fā)病后數(shù)月后,才檢出,故不宜作早期診斷。
-約由20%的病人不出現(xiàn)抗體。IgM抗-C100急性期檢出率只有64%。
-C100的抗原性較弱,在HCV復制中,ELISA試劑盒進口大鼠不能充分暴露宿主的免疫系統(tǒng)。